流式细胞分选_流式细胞分选仪品牌

流式细胞分选怎么计算纯度和得率

纯度： 分选后，在所得样本中取样，然后使用分选时相同的设置上机，只不过不分选，而只是分析。同样的gate，得到阳性比例，就是纯度了。这个是分选后必须要做的。

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得率：分选前先计数你细胞的总数，然后根据阳性率计数你样本中阳性细胞的总数。分选后，计数所得细胞总数，然后根据纯度就算所得阳性细胞总数。所得阳性细胞总数除以样本阳性细胞总数就是回收率了。

细胞计数可以使用计数微球在流式细胞仪上进行

想做流式细胞分选实验,请教具体步骤

具体的步骤都是很繁琐的，而且每个实验都不尽相同。只能告诉你这些原则：

步就是设计，你的分选标记是什么，如果是表面抗体标记，标记后会不会诱导细胞激活，会不会影响下游的实验，这些都要弄明白。

第二步，选择你所要用仪器兼容的荧光素。比如你们实验室的仪器没有紫外激光，可是你选用了只有紫外荧光才能激发的荧光素。仪器就不能识别

第三步，准备单细胞悬液。这个也要根据你的实验材料，是培养的细胞，还是整块的组织，或者悬浮细胞，方法有不同。需要找到自己化的方法。原则就是限度的得到活细胞而且保持细胞处于非粘附状态。

第四部，染色。

第五部，分选。根据实验的要求，可以收集到管子里，或者96孔盘，每孔一个细胞。也是根据实验要求而定

什么情况下细胞必须进行流式分选

在实际细胞分离中给，因为流式分选的办法价格相对比较昂贵，实验者一般都会采取别的方法分离细胞。下面列出来几种其它细胞分离方法不能替代的情况，这些情况下 必须进行细胞的流式分选：

1、要求目标细胞群有极高的纯度(95%-)；

2、需要分离低密度表面受体/抗原的细胞；（弱阳性细胞）

3、需要根据表面受体密度的别来分离不同细胞；（根据免疫表型的分选，抗体亲和力进化等）

4、需要依据多色荧光标记来分选细胞；

5、根据某些细胞内部标志，如DNA含量、胞内抗原等分离细胞；

6、多孔板分选。如单克隆分选，在96孔板每个孔中的分选进1个细胞；

7、需要分选极低含量的细胞（如0.001%或更低）。流式可以分选出百万分之一的稀有细胞。

南昌中洪博元技术部

如何用流式分选出T，B淋巴细胞

如何使用流式细胞术的技术来区分b淋巴细胞和t淋巴细胞

a、b淋巴细胞和t淋巴细胞来源于造血干细胞，b淋巴细胞在骨髓中发育成熟，a错误；

b、b淋巴细胞受到抗原后，增殖分化形成效应b细胞，再产生特异性的抗体，b错误；

c、只有t淋巴细胞在胸腺中发育成熟，c错误；

d、体液免疫是通过浆细胞产生抗体发挥作用，细胞免疫依赖效应t细胞发挥免疫作用，d正确．

故选：d．

流式细胞分选的特点

1. 少量细胞分选时，流式细胞分选度高（99%以上），速度快。先进的流式细胞仪的分选速度可达25000个细胞/秒以上，比传统的分选速度提高了很多倍，需要一天的工作只需要几小时就能完成。不过流式细胞仪分离细胞的量还是有一定的限制，一次分离的合理量约为10个细胞。如果细胞量超过10个，则需要耗费10小时以上，分选后细胞的活力会受到很大的影响.

流式细胞分选技术中，细胞分选得率与下列哪项为相关

【答案】：A

分选得率与细胞分选的速度密切相关，当分选速度过高，细胞信号通过检测时会使部分目的细胞漏检，使得率下降；分选速度降低，目的细胞信号被检时间增加，得率增加。

流式细胞分选的应用

流式细胞分析/分选系统主要应用于： 1）干细胞组织工程在研究；2）细胞增值、活性和凋亡研究；3）疾病细胞如炎症细胞、肿瘤细胞等的发生、发展和转归研究；4）基因表达和表达调控研究；5）细胞内信号传导和生物大分子间相互作用研究；6）各种病原体如、细菌等基础和致病性和致病机理研究；7）理效和物开发研究；8）移植和细胞治疗研究；9）生物材料对细胞结构、活性和功能的影响等。利用仪器的分选功能分选得到高纯度、高活性的稀有细胞，通过直接培养、诱导、增殖、分化、活化和移植等进行更深一步的细胞功能和细胞治疗探索，还可以在此基础上逆向进行基因组合蛋白质组相关研究，寻找致病基因、致病蛋白和疾病信号传导方式。

流式细胞分选的细胞分选的原理

当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入样品管中，被高压压入流动室内。流动室内充满鞘液，在鞘液的包裹和推动下，细胞被排成单列，以一定速度从流动室喷口喷出。在流动室的喷口上配有一个超高频的压电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正、负不同的电荷，当液滴流经过带有几千伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，没有充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。