高效液相色谱的使用流程 高效液相色谱的使用流程是什么

高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程为开机、超声、排气、走基线。

高效液相色谱的使用流程 高效液相色谱的使用流程是什么

1、开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤，有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱，影响柱效能）

注意：试验过程中由于只有0.45μm的混合滤膜，第一次使用时感觉效果不好，于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。

2、超声结束后，将流动相放置到规定位置（1号泵接水流动相，2号泵接有机流动相），开机逐个排气（先启动泵，排气结束后再打开检测器）。

3、排气结束后，关闭所有排气阀。先用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，基线走稳之后，再打开水流动相（注意：水流动相和有机流动相流速之和为1ml/min），继续走基线，直到基线平稳。

注意：实验结束后，再用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，冲出色谱柱内残留的样品物质，预防长时间不使用仪器样品的残留物质沉积在色谱柱内，导致下次使用难以冲出，色谱柱柱压偏高，基线不稳，出现大量鬼峰。

4、走基线时，应将进样阀处于Load状态，用注射器进样时应快速进样，进样后将进样阀立即扳回到Inject状态，此时液相系统开始进入采样状态。采样结束后，可在数据分析里面查看分析结果并可进行编辑，也可以在脱机状态下查看样品的分析结果并编辑。

数据分析：

色谱得到的原始数据为色谱图，我们需要对途中的色谱峰进行积分，获得峰面积，并根据实验需要，使用不同的方法进行定量计算，比如外标法，内标法，面积百分比法等。

仪器还可以得到光谱或者质谱信息，我们可以通过色谱柱数据软件的对应功能得到光谱图及质谱图，获得定性信息。

获得所需信息后，可以利用色谱软件将结果输出成不同格式的报告，或将处理好的结果导入其他软件（如统计分析）进行二次处理。

高效液相色谱仪器怎么操作啊？简单吗？

楼上的是气相色谱仪吧

我们做过那东西,特难侍候

结构一般是高压泵,进样器,分离柱,检测器

高效液相主要是靠计算机软件,只要把前面的弄好了后面自动出数,

高压泵没什么,设好就行了,进样器烦,自动的还好,要是手动用微量注射器推的那种会把你弄抓狂,偏太多,重复性不好,其它的就没什么了,选好波长等着电脑出数就行了

仪器越先进使用简单得只按按钮就行.

液相色谱仪的使用步骤是什么？

目的：制定规范的高效液相色谱仪操作、维护保养和清洁规程。

范围：适用于Agilent 1260 HPLC。

责任：色谱检验工程师负责本规程执行。

内容：

1 开机

1.1 打开电脑。

1.2 打开液相色谱各个模块的电源。

1.3 双击桌面“仪器—联机”，进机界面。

1.4 排气：

1.4.1 手动旋开泵处冲洗阀（逆时针旋转约1圈）。

1.4.2 右键单击“泵”图标区域，选择“方法…”选项，进入泵编辑画面，设流速：5ml/min（一般为3－5ml/min），点击“确定”。

1.4.3 右键单击“泵” 图标，点击“控制…”选项，选中“ON”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，（一般为5分钟），切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

1.4.4 右键单击“泵” 图标，点击“方法…”选项，设流速：0ml/min，手动旋紧冲洗阀。

1.4.5 右键单击“泵”图标，点击“方法…”选项，按照方法要求选择合适比例的流动相，设流速：1.0ml/min。

1.4.6 同理右键单击“柱温箱”，“检测器”图标，点击“方法…”选项，按照方法的要求设置温度，波长，点击“控制” 选项，“ON”打开柱温箱和检测器。

2 编辑方法

2.1 点击“方法”－“编辑完整方法”开始编辑完整方法。

2.2 选中除“数据分析 ”外的三项，进入下一选项卡。

2.3 方法信息：在“方法注释”中加入方法的信息（如：This is for test!）。进入下一选项卡。

2.4 泵参数设定：在“流速”处输入流量, 如1.0ml/min，停止时间：如10 min（该停止时间仅为做一个样品需要的时间），按照要求选择合适比例的流动相配比，如乙腈：水＝75：25，A为水，B为乙腈，则设置B：75％即可。进入下一选项卡。

2.5 自动进样器参数设定: 选择“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，进入下一选项卡。

2.6 柱温箱参数设定: 在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。进入下一选项卡。

2.7 UV检测器参数设定: 在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm。点击确定。

2.8 在“ 运行时选项表 ”中，选中“ 数据采集”，点击“确定”。

2.9 从“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定。

3 单次采集

3.1 从“运行控制”菜单中，选择“样品信息”选项，选择合适的路径，在“数据文件”中选择 “前缀/计数器”，输入样品瓶的位置，点击“确定”。

3.2 基线平稳后约10分钟，从“运行控制”菜单中选择“运行方法”。

4 多次数据采集

4.1 按照步骤2 编辑完整方法。

4.2 点击“序列”－“序列表”，输入“样品瓶”“样品名称”，“进样次数”，选择合适的“做样方法”

4.3 点击“序列”－“序列参数”，选择序列数据的保存路径（序列会自动生成以“序列名称－时间”为名称的文件夹保存数据），数据建议以选择 “前缀/计数器”保存。

4.4 从“序列”菜单，选中“序列另存为…”，输入一序列名，如“测试”，点击“确定。

4.5 从“运行控制”菜单中选择“运行序列”。

5 数据分析（脱机状态使用）

5.1 双击“仪器 —脱机”图标 进入的脱机画面。

5.2 从“视图”菜单中，点击“数据分析”进入数据分析画面。

5.3 从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名。点击“ 确定”，则数据被调出。（如预建立标准曲线，应先打开浓度较低的标样图谱。）

5.4 做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”。从“范围” 中选择“满量程” 或“自动量程” 及合适的时间范围或选择“自定义量程” 调整。反复进行，直到图的比例合适为止。点击“ 确定”。

6 积分:

6.1 从“积分”菜单中选择“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”，“峰宽”，“小峰面积”，“小峰高”。点击 ，自动加载积分参数。

6.2 点击左边“√”图标，将积分参数存入方法并退出“积分事件”。

6.3 如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。

7 标准曲线

7.1 点击“校正”－“校正设置”，输入“含量单位”。

7.2 点击“校正”－“新建校正表”，点击确定。输入“化合物名称”和“含量”，点击“确定”，按照提示删除其他组分。

7.3 至此完成单级校正，如要增加校正级别，应从“文件”菜单选择“调用信号”，选中您的数据文件名（第二个标样），点击“校正”－“添加级别”，点击确定，输入“含量”，依次增加校正级别。

8 打印报告

8.1 从“报告”菜单中选择“设定报告”选项，点击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角，选中“外标法”，其它选项不变，点击“ 确定”。

8.2 从“报告”菜单中选择“打印报告”，则报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，则点击“报告” 底部的“打印”钮。

8.3 点击“文件”－“另存为”－“方法”，把数据分析方法保存，下次分析可直接在“文件”－“调用”－“方法”下，将该方法调出使用。（调用的方法中含有积分方法，标准曲线方法和打印报告方法）

9 关机

9.1 关机前，先关紫外灯，用相应的溶剂（甲醇或乙腈）充分冲洗系统大约30分钟。（色谱柱终应保存在甲醇或乙腈中）

9.2 退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机。

9.3 关闭Agilent 1260各模块电源开关。

10 其它注意事项

10.1 当样品运行时，切勿打开自动进样器前遮盖，否则进样过程停止。

10.2 系统发生漏液时，机器会检测到并停止进样，状态指示灯为红色。检查擦干并安置好漏液处，擦干漏液传感器，单击ON按钮，系统重新初始化。

10.3 注意紫外灯使用寿命，切勿来回开关紫外灯。

高效液相色谱仪操作流程

高效液相色谱仪操作流程如下：

工具/原料：电脑、安装调试完的液相色谱系统。

1、首先把连接液相系统的电脑打开，接着长按泵系统上面的开关5秒左右。

2、接着长按柱温箱系统上的开关5秒左右。

3、然后长按检测器系统上的开关5秒左右。

4、在自动进样器中放入待测样品，系统可以完成自动进样。

5、自动完成分析过程，后在电脑上打开色谱工作站，观察实验数据就可以了。

高效液相色谱仪的基本操作

1)过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。2)抽滤后的流动相超声脱气10-20分钟。3)打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪)，连接流动相管道和检测系统。4)进入HPLC控制界面的主菜单，点击手动进入手动菜单。

液相色谱仪操作流程

1、开机：依次打开脱气机、色谱泵、检测器、计算机电源；待各设备自检正常后，启动色谱管理系统。

2、流动相准备：过滤，脱气。

3、色谱泵排气。

4、安装色谱柱。

5、平衡流动相（有机溶剂与缓冲盐溶液切换时等易产生沉淀，需先使用90%超纯水/10%甲醇作为流动相冲洗系统）。

6、数据采集、进样。

7、冲洗管路及色谱柱。

8、数据处理。

9、关机。

10、记录相关信息。

高效液相色谱的流程

流程：如右图所示，溶剂贮器⑴中的流动相被泵⑵吸入，经〔3〕梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出，经⑷测其压力和流量，导入(5进样阀（器）经⑹保护柱、⑺分离柱后到⑻检测器检测，由⑽数据处理设备处理数据或⑾记录仪记录色谱图，⑿馏分收集器收集馏分，⒀为废液。