pmsf是什么 提蛋白pmsf是什么

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1、PMSF即Phenylmanesulfonyl fluoride的缩写,中文名为磺酰氟。

2、本品是一种传统的细胞组织快速裂解液。

3、使用本品裂解得到的蛋白样品可以用于常规的WB实验是通过聚凝胶电泳（PAGE）将混合蛋白质样品分离后，利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质（例如PVDF膜）上，再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。

4、Western、IP 等。

5、主要成分为50mM Tris (pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40， 0.1% SDS。

6、使用本品裂解得到的蛋白样品，可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。

7、由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford 法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

8、制备细胞裂解产物：1、800g 4℃离心5 分钟，收集细胞，估计细胞离心后的体积(PCV,106 cells ≈ 20ul PCV,107 cells ≈ 100 ul PCV)分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；3、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物；4、假如所得蛋白产物较为粘稠，可95℃加热5 分钟，然后迅速冰浴5 分钟，12000g 4℃离心1、取50-100mg 组织在冰上剪成碎片，用预冷的PBS 洗涤2 次，离心弃去PBS；3、4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40 次，直到95%的细胞被破碎，然后在冰浴中放置10 分钟，且每隔5 分钟在漩涡混合仪震荡30 秒；4、12000g 4℃离心10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物；10 分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物。

9、6、20%的甘油保存于-70℃或-20℃。

本文到这结束，希望上面文章对大家有所帮助。