求细胞冻存液的主要作用及成分。越全越好。。
作用:可保护细胞免受溶液损伤和冰晶损伤。
细胞冻存的目的是什么_细胞冻存-80°c时间
渗透性冷冻保护剂:可以渗透到细胞内,一般是一些小分子物质,主要包括甘油、DMSO、乙二醇、、乙酰胺、甲醇等。
非渗透性冷冻保护剂:不能渗透到细胞内,一般是些大分子物质,主要包括聚乙烯酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及淀粉等。
冷冻保护剂同溶液中的水分子结合,发生水合作用,弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成,同时冷冻保护剂可以通过在细胞内外维持一定的摩尔浓度,降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度,使细胞免受溶质的损伤。
渗透性冷冻保护剂的保护机制是在细胞冷冻悬液完全凝固之前,渗透到细胞内,在细胞内外产生一定的摩尔浓度,降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度,从而保护细胞免受高浓度电解质的损伤同时。细胞内水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩。
扩展资料:
保护剂使用注意
1.从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生长期细胞。在冻存前一天换一次培养液。
2.将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。
3.冻存和复苏用新配制的培养液。
参考资料来源:
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细胞冻存时为什么要加入保护液
细胞冻存时为加入保护液,是为了保护细胞免受溶液损伤和冰晶损伤。
加入保护液后可以使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内的水分透出,减少了冰晶的形成,从而避免细胞的损伤。采用慢冻快融的方法能较好地保证细胞存活。
保护液类型有甘油、DMSO、乙二醇、、乙酰胺、甲醇等。
注意事项:
1.DMSO不用高压灭菌;DMEM不能高温高压灭菌,可以过滤除菌。
2.DMSO要用新的,而且要避光保存。
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。
以上内容参考:
细胞存储有什么意义?
细胞是生物体基本的结构和功能单位。细胞储存是通过一定的方法,将细胞保存一定的期限,保证细胞的功能和活性不受明显的影响。
细胞存储意义还不止于干细胞存储。免疫细胞存储、成纤维细胞存储等,都是现在流行、已经科学证实可行的细胞保健方式。免疫细胞是人体健康的卫士,2018年获得诺贝尔奖的癌症免疫治疗,说的就是免疫细胞的功能和作用。
细胞冻存的注意事项
细胞培养的传代及日常维持过程中,在培养器具、培养液及各种准备工作方面都需大量的耗费,而且细胞一旦离开活体开始原代培养,它的各种生物特性都将逐渐发生变化并随着传代次数的增加和体外环境条件的变化而不断有新的变化。
因此及时进行细胞冻存十分必要。细胞冷冻储存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。
求细胞冻存液的主要作用及成分。越全越好。。
细胞冻存液的作用是将活细胞冻存后,长期保存。
一般配置冻存液有两种配方
1.
培养基,血清,DMSO配比为7:2:1
2.
血清,DMSO配比为9:1
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