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甲基绿吡罗红染色原理 甲基绿吡罗红染什么

为什么DNA中加入甲基绿会变绿色,RNA中加入吡罗红会变红色。

1.甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同。甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出蓝绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。

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2.不是DNA变绿色,而是甲基绿易与聚合程度高的DNA结合被染成绿色,而吡罗红则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色(但解聚的DNA也能和吡罗红结合呈现红色),总之RNA对吡罗红亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,被染成绿色。

为什么甲基绿和吡罗红要混合使用,且要现配现用

原因是甲基绿—吡罗红为碱性染料,它们分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与吡罗红作为混合染料时,甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;吡罗红与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。

配制好的吡罗红甲基绿溶液易氧化,且在光照下氧化加剧,所以现配现用。若是配制完用不了,应避光保存,故在棕色试剂瓶中保存。

原因是甲基绿—吡罗红为碱性染料,它们分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与吡罗红作为混合染料时,甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;吡罗红与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。配制好的吡罗红甲基绿溶液易氧化,且在光照下氧化加剧,所以现配现用。若是配制完用不了,应避光保存,故在棕色试剂瓶中保存。

单独使用甲基绿,也会把RNA染成绿色,甲基绿与吡罗红须混合使用,原因与染料和核酸的分子构象有关

化学试剂久置易变质(光解、氧化、沉淀)

这两种染料在混合染液中有竞争作用,所以混合使用

RNA对吡罗红亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,被染成绿色。

配制好的吡罗红甲基绿溶液易氧化,且在光照下氧化加剧,所以现配现用。

染色剂的使用原理和使用方法归纳都是什么?

1。甲基绿和吡罗红:实验原理:甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.利用甲基绿,吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布.\x0d\x0a试剂及配制方法\x0d\x0a(1)试剂 质量分数为0.9%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,乙酸钠,乙酸,蒸馏水,吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉,可以分别购买甲基绿和吡罗红G,然后按A液的第二种方法配制(见下文)。\x0d\x0a(2)染色剂的配制\x0d\x0a①染色剂A液的两种配制方法\x0d\x0a种方法:取吡罗红甲基绿粉1 g,加入到100 mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。\x0d\x0a第二种方法:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用。(注意:用于核酸染色的是吡罗红G,请不要错买吡罗红B。)\x0d\x0a②染色剂B液的配制方法 B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4 g,用蒸馏水溶解至1 000 mL备用;再取乙酸12 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL备用。取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL,加蒸馏水50 mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)。\x0d\x0a③染色剂的配制染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现用现配。\x0d\x0a2。龙胆紫和醋酸洋红:\x0d\x0a染色质(体)容易被碱性染料染成深色。作为染色剂必须具备两个条件:一是具有颜色;二是要与被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的,产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。作为染料物质,除了有发色基团外,还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团。染色剂的酸、碱性界定并非由染料溶液的pH值决定,而是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱性染色剂,反之则为酸性染色剂。\x0d\x0a醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在煮沸的45%醋酸中加洋红使之饱和,再加入微量的铁离子,便使醋酸洋红材料在为醋酸固定的同时,\x0d\x0a洋红将核或染色体染成红色。用龙胆紫可将染色体染成蓝紫色。\x0d\x0a3。伊红美蓝:伊红和美蓝是两种苯胺类染料,可以抑制革兰氏阳性菌的生长。同时,这些染料可以区分那些发酵乳糖的微生物。大肠菌群因其强烈发酵乳糖而产生大量的混合酸,使菌体表面带上正电荷,可染上伊红染料,伊红与美蓝结合,菌体被着上深紫色,在含有两种染料呈紫色的培养基上,形成带核心、具金属光泽的菌落。因此可以用伊红和美蓝鉴别革兰氏阴性菌(大肠杆菌)的存在。\x0d\x0a4。:\x0d\x0a是一种非极性芳香族有机分子,有毒,熔点比水低,微溶解于水,易溶解于酒精、冰乙酸等有机溶剂。化学性质活泼,遇光易变色。因此要放置于暗处保存。\x0d\x0a试剂鉴定DNA的原理:DNA分子中的脱氧核糖在酸性环境下生成ω-羟基-γ-酮基戊醛,再与试剂结合显蓝色,颜色的深浅与溶液中的DNA含量成正比。\x0d\x0a试剂的配制:A液:1.5克溶解于100ml冰乙酸中,在加入1.5ml浓硫酸(此处浓硫酸的作用可能是作为强氧化剂来维持试剂的稳定),配制好的A液保存在棕色瓶中。B液:体积分数为0.2%的乙醛。由于乙醛是一种还原性试剂,所以实验前不能将A液和B液混合在一起。同时因为试剂性质不稳定,极易变色,因此建议现配现用。\x0d\x0a5。双缩脲:鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的铜离子与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。\x0d\x0a6。斐林试剂:由的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液,还有酒石酸钾钠配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖)、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀\x0d\x0a。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。\x0d\x0a7.班氏试剂:\x0d\x0a班氏试剂常用于尿糖的鉴定,其配方与斐林试剂不一样,其配方为:\x0d\x0a①400ml水中加85g柠檬钠和50g无水碳酸钠;\x0d\x0a②50ml加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成溶液;\x0d\x0a③把溶液倒入柠檬酸钠溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。\x0d\x0a(2)其反应原理与斐林试剂略有别。利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生,与柠檬酸钠溶液和溶液混合时,结合,生成与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。\x0d\x0a(3)两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生,很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠为一对缓冲物质,产生的数量有限,与溶液混合后产生的浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。

甲基绿吡罗红染色原理是什么?

甲基绿和吡罗红都易与DNA结合而被染成相应的深色,但甲基绿与DNA结合能力比吡罗红强且稳定,已被甲基绿染色的DNA再难以被吡罗红染色,而已被吡罗红染色的DNA易被甲基绿再染色;RNA与吡罗红结合能力比DNA强。

因此用甲基绿吡罗红混合液染色时,DNA首先与甲基绿结合,而使之染为绿色,而不再与吡罗红结合,RNA则与吡罗红结合,而使之染为红色。用混合液染色,2种染液基本互不影响。

扩展资料:

注意事项:

尽量减少反复冻融的次数,以免失效。

在使用Trypsin-EDTAsolution过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。

Trypsin-EDTAsolution消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较。

为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套作。

参考资料来源:

参考资料来源:

生物问题,甲基绿和吡罗红在鉴定DNA ,RNA的显色原理。

甲基绿—派洛宁(又名吡罗红)(methyl green-pyronin)为碱性染料,它分别能与细胞内的DNA、RNA结合呈现不同颜色。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时,甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色(但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色)。即RNA对派洛宁亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,被染成绿色。

甲基绿—派洛宁又叫unna试剂

(网上找的,更专业一点,希望有用(^__^) 嘻嘻……)

甲基绿和吡罗红是什么

甲基绿和吡罗红是两种碱性染色剂,甲基绿将DNA染色为绿色,砒罗红是将RNA染色为红色。他们通常混合使用,可将细胞核部分染成绿色,细胞质部分染成红色。

甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。

染色原理

即吡罗红G,又名派洛宁G,吡罗红使RNA呈现红色,常用于检测细胞中RNA的分布。当甲基绿与派洛宁作为混合染料时,甲基绿与染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;派洛宁与核仁、细胞质中的RNA选择性结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚合程度有所不同。

甲基绿和吡罗红是两种碱性染色剂,甲基绿将DNA染色为绿色

,砒罗红是将RNA染色为红色。他们通常混合使用,可将细胞核部分染成绿色,细胞质部分染成红色。

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