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流式细胞检测的内容 流式细胞检测技术原理

流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测

流式可以检测的样本很多:

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细胞表面的蛋白,通过荧光抗体直接标记

细胞内部的蛋白,细胞固定,通透后再用荧光抗体识别

细胞内部的DNA含量,细胞固定,通透后加DNA染料

细胞内部钙离子浓度,直接加钙离子浓度荧光染料染色

细胞内部线粒体膜电位,比如JC-1,罗丹明染料

使用微球阵列,可以同时检测溶液中数十种可溶性蛋白的浓度

流式细胞仪原理

我简单说一下:\x0d\x0a1.首先,机器吸取细胞混悬液,射入由鞘液(一般都是缓冲液)。由于鞘液的流速大,所以细胞混悬液通过轴流的形式在,一般是单个细胞排队的形式。\x0d\x0a\x0d\x0a2.然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色,被激光照射后,会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱\x0d\x0a\x0d\x0a3.根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果(比如抗原量,DNA量,等等)

细胞内细胞因子的流式细胞怎样检测?

胞内流式分析法是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合,即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌,同时采用特殊的化学与抗体选择,确保静止与无细胞因子分泌细胞的小荧光背景。具有其它方法难以比拟的优点: 快速:流式定量检测细胞内细胞因子可在一天内完成,实验流程需6-8小时,实际作时间为1-2小时,快速简便; 简便:无需组织培养,可以全血分析,无需分离PBMCs; 灵敏度高:高度灵敏的荧光标记与检测系统; 高效:可以在同一个细胞内同时检测两种或更多种细胞因子,也可根据细胞免疫表型区分分泌细胞因子的细胞的亚型,进行多参数相关分析; 安全:减少样本处理与生物源性污染 接近生物体的分析条件:全血检测保留细胞及生化微环境更准确反映了体内状况。 生物帮上面有这方面的详细内容,SDS提取法

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