细胞冻存盒的使用步骤，你知道多少？

源源今天给分享细胞冻存盒的使用步骤的知识，其中也会对冻存盒冻存细胞进行解释，希望能解决你的问题，请看下面的文章阅读吧！

细胞冻存盒的使用步骤，你知道多少？

1、一、细胞冻存方法：冻存液现配：按1：3：6（或1：2：7） 配冻存液1份DMSO3份血清和6份培养基(养细胞时用什么培养基冻存时就用什么培养基)。

2、取生长状态量好的细胞进行冻存处理，对于贴壁细胞：1 吸出旧培养液加PBS冲洗一次2胰酶消化3加培养基中止消化，有的细胞是加血清中止4离心收集细胞，不同细胞离心率不一样（以上仅为贴壁细胞，悬浮细胞收集就用第四部）5吸出离心管上清液，加1ML 的冻存液重悬细胞，移到冻存管，放4度半小时，-20 度两小时，-70度过夜，再放液氮长期保存悬浮细胞：直接离心收集，PBS洗涤注意事项：错误的时机：细胞状态不好（长的太过了，培养液已经很黄；细胞可疑污染；细胞已 经开始凋亡或崩解；连续培养超过二个月，细胞性状已有改变改变）。

3、解决：时机：细胞增殖旺盛，情况稳定，试验效果良好，复苏后两周内。

4、2.细胞太少：冻存时细胞浓度低于1-5×1000,000/ml。

5、（复苏很难成功）。

6、解决：离心后调整细胞浓度。

7、（不要重新洗细胞）。

8、3.盖子不紧：冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成污染。

9、解决：选择原配的管子和盖子（不同牌子/型号的颜色会有别）。

10、4.单薄的冻存盒：放在－80度的冻存盒，壁太薄，细胞在被迅速降温。

11、解决：选择厚壁泡沫塑料盒，或塞入大量干棉花。

12、（冻存的原则：缓降！）5.-80度太久：放在－80度冰箱的时间超过半年。

13、（冰箱的温度难以恒定:开门/关门，电压不稳等）解决：尽快转入液氮。

14、6.液氮不足：液面不能漫过所有细胞解决：定期测量液氮储备，保证细胞全部浸在液面下。

本文到这结束，希望上面文章对大家有所帮助。