超高效液相色谱质谱仪_高效液相色谱仪质谱联用仪

高效液相色谱仪的使用和原理分析

实验内容和原理：

超高效液相色谱质谱仪_高效液相色谱仪质谱联用仪

储备器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）中；由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的别，被分配成单个祖坟依次从柱内流出，经过哦检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。

在适宜的条件下，高效液相色谱可分离溶液中不同的组分，样品进高效液相色谱仪，经反相C\18液相色谱分离后，以色谱峰的保留时间定性，利用色谱峰面积在一定范围内与浓度成线性关系进行定量。本实验采用内标法，用β-胡萝卜素标准品分析未知浓度的类胡萝卜素产物的相关含量。

实验步骤：

1、 样品和标准品溶解和过滤：用丙酮作溶剂，溶解β-胡萝卜素标准品和类胡萝卜素样品。用滤膜（0.45um）过滤，备用。

2、 开机，依次通过各分离单元、检测器、计算机电源。

3、 流动相脱气，确认所有溶剂管路都充满溶剂。

4、 启动溶剂管理系统，冲洗自动进样器和进样针，装入样品和转盘，编辑分析方法及执行样品分析表。

5、 样品测定：色谱条件，色谱柱（C18，4.6mm250mm，5um）；流动相，甲酸；乙腈；=5：4：1（v/v）；流速 1ml/min；检测波长，480nm。

单位内标法定量：取混合使用液20ul注入高效液相色谱仪进行分离。记录各个峰的峰面积。按下式计算相对含量。

q样品=（q标准品A样品）/A标准品

6、 关机，使用完毕后，按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫，关闭电源开关。数据采集完毕后，关闭紫外检测器电源开关。处理数据后，关闭计算机电源开关，并做使用登记。

高效液相质谱联用仪的工作原理，可以告诉我吗？

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内。

由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样本浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式输出检测结果。

扩展资料

液相色谱（LC）能够有效的将有机物待测样品中的有机物成分分离开，而质谱（MS）能够对分开的有机物逐个的分析，得到有机物分子量，结构（在某些情况下）和浓度（定量分析）的信息。

电喷雾电离技术造就了LC-MS质谱图简洁，后期数据处理简单的特点。LC-MS为有机物分析实验室，物、食品检验室，生产过程控制、质检等部门必不可少的分析工具。

参考资料来源：

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高效液相色谱仪作流程

高效液相色谱仪作流程为开机、超声、排气、走基线。

1、开机前先将流动相过滤和超声：水流动相用混合滤膜（0.2μm）过滤，有机流动相用有机滤膜过滤，之后超声脱气15-20分钟。（过滤的目的是除去流动相里的杂质，以免杂质进入色谱柱堵塞色谱柱；超声的目的是排除流动相里面的气体，以防气体进入色谱柱损害色谱柱，影响柱效能）

注意：试验过程中由于只有0.45μm的混合滤膜，次使用时感觉效果不好，于是过滤水时同时使用两张混合滤膜过滤水流动相。

2、超声结束后，将流动相放置到规定位置（1号泵接水流动相，2号泵接有机流动相），开机逐个排气（先启动泵，排气结束后再打开检测器）。

3、排气结束后，关闭所有排气阀。先用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，基线走稳之后，再打开水流动相（注意：水流动相和有机流动相流速之和为1ml/min），继续走基线，直到基线平稳。

注意：实验结束后，再用纯有机流动相冲洗色谱柱20-30分钟，冲出色谱柱内残留的样品物质，预防长时间不使用仪器样品的残留物质沉积在色谱柱内，导致下次使用难以冲出，色谱柱柱压偏高，基线不稳，出现大量鬼峰。

4、走基线时，应将进样阀处于Load状态，用注射器进样时应快速进样，进样后将进样阀立即扳回到Inject状态，此时液相系统开始进入采样状态。采样结束后，可在数据分析里面查看分析结果并可进行编辑，也可以在脱机状态下查看样品的分析结果并编辑。

数据分析：

色谱得到的原始数据为色谱图，我们需要对途中的色谱峰进行积分，获得峰面积，并根据实验需要，使用不同的方法进行定量计算，比如外标法，内标法，面积百分比法等。

仪器还可以得到光谱或者质谱信息，我们可以通过色谱柱数据软件的对应功能得到光谱图及质谱图，获得定性信息。

获得所需信息后，可以利用色谱软件将结果输出成不同格式的报告，或将处理好的结果导入其他软件（如统计分析）进行二次处理。

高效液相色谱仪哪家好

高效液相色谱仪较好的厂家有上海惠分科学分析仪器有限公司、济南精测电子科技有限公司、北京翔悦环宇科技发展有限公司、山东熙谷仪器设备有限公司、惠州市华高仪器设备有限公司。

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5、上海惠分科学分析仪器有限公司

上海惠分科学分析仪器有限公司是气相色谱仪，液相色谱仪，氢气发生器的优良生产制造厂家，提供全新优良的GB 5009266-2016食品中甲醇分析色谱柱，993967-902 XDB-C18色谱柱，医疗器械残留检测气相色谱仪等系列产品。