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革兰染色法的原理 革兰染色法的原理主要是

革兰染色的原理

革兰染色的原理如下:

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1. 通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。

2. 革兰阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇或丙酮脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色。

3. 革兰阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄,网孔数目较多,经乙醇或丙酮脱色处理后,细胞壁脱水引起网孔扩大,未被固定的结晶紫与碘复合物通过孔径进入细胞壁内,经丙酮处理后,复合物便溶于其中,使细胞脱色。

4. 革兰阴性菌因失去结晶紫与碘复合物而出现红色。

希望以上信息对回答您的问题有帮助。

革兰染色的原理,方法和意义

革兰氏染色法的原理是细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,呈紫色。

肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。

革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家汉斯·克里斯蒂安·约阿希姆·革兰氏(HansChristianJoachimGram1853-1938)创立。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等。革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。这种染色法是由丹麦医生革兰于1884年所发明,初是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌,由于其与周围环境折光率别甚小,故在显微镜下极难区别。经染色后,阳性菌呈紫色,阴性菌呈红色,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,从而用以分类鉴定。染色原理:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,再用95%乙醇脱色。革兰氏染色关键步骤是脱色。因为在染色时,乙醇脱色是革兰氏染色作的关键环节,脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌,脱色过度,阳性菌被误染成阴性菌,脱色时20~30s。革兰氏染色(GramStaining)是用来鉴别细菌的一种方法:这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同,可将细菌分成两类,即革兰氏阳性(GramPositive)与革兰氏(GramNegative)。这一染色方法由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明,初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系,后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一,对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。

医学微生物学中革兰染色的原理

革兰阳性菌细胞壁较厚乙醇脱色时,肽聚糖层通透性降低与细胞结合的结晶紫与碘的复合物在细胞壁仍保留初染时的颜色。革兰阴性菌壁薄乙醇脱色增加了细胞壁的通透性,初染的结晶紫碘复合物渗出经复染又染上复染的颜色

简述革兰氏染色原理

革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。

革兰氏染色法的原理:

革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类,是细菌学上常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。

通过初染和媒染后,细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高和其分子交联度较紧密,故在用乙醇洗脱时,肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩,加上它基本不含类脂,故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙。

因此,结晶紫与碘复合物仍牢牢阻留在细胞壁内,使其呈现紫色。而革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联松散,故遇乙醇后,肽聚糖网孔不易收缩,加上它类脂含量高,所以当乙醇把类脂溶解后,在细胞壁上就会出现较大缝隙,复合物容易溶出细胞壁。

通过乙醇脱色后,细胞又成无色。这时再用红色染料进行复染,革兰氏阴性细菌将获得一层新的颜色-红色,而革兰氏阳性菌则仍呈紫色。

革兰氏染色流程及常见种类:

革兰氏染色流程

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体作方法是:

1、制片、取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。

要用活跃生长期的幼培养物作革兰氏染色;涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性;火焰固定不宜过热(以玻片不烫手为宜)。

2、初染。滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)染色1-2min,水洗。

3、媒染。用碘液冲去残水,并用碘液覆盖约1min,水洗。

4、脱色。用滤纸吸去玻片上的残水,将玻片倾斜,在白色背景下,用滴管流加95%的乙醇脱色,直至流出的乙醇无紫色时,立即水洗。

乙醇脱色是革兰氏染色作的关键环节:脱色不足,阴性菌被误染成阳性菌;脱色过度,阳性菌被误染成阴性菌。因而脱色时间一般为20-30s。

5、复染。用番红液复染约2min,水洗。

6、镜检。干燥后,用油镜观察。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌,被染成红色的为革兰氏阴性菌。

革兰氏染色的常见种类:

常见的革兰氏阳性菌有葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。

常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等及脑膜炎双球菌等。

革兰氏染色的步骤和原理

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体作方法是:

1)涂片固定。

2)草酸铵结晶紫染1分钟。

3)蒸馏水冲洗。

4)加碘液覆盖涂面染约1分钟。

5)水洗,用吸水纸吸去水分。

6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20秒后水洗,吸去水分。

7)蕃红染色液(稀)染1分钟后,蒸馏水冲洗。干燥,镜检。

原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。

革兰氏染色法的意义

革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌,把众多的细菌分为两大类,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感):大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,可以选择青霉素族,头孢曲松钠等。

革兰氏阴性菌,大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感,可以选择氟喹诺酮类物如诺氟沙星,左氧氟沙星等,也可以选择大环内酯类比如克拉霉素、罗红霉素等。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌,在选择抗生素方面意义重大。

步骤:包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。

原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率别甚小,故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法。

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。

未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率别甚小,故在显微镜下极难观察阳性紫色阴性红色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。

一、 目的:在细胞发放之前,利用标准的革兰氏染色法对即将发放的细胞悬液进行检测,判断细胞悬液中是否含有革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌。

二、 原理:

(视频)革兰氏染色法

简述革兰氏染色的原理

革兰氏染色法,是将所有细菌区分为革兰氏阴性菌(G-)和革兰氏阳性菌(G+)两大类,是细菌学中为常用的鉴别染色法。这种染色的方法能够将细菌分为阴性和阳性,主要认为革兰氏颜色染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。

革兰氏染色法,是指细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,这种染色法是由丹麦的医生革兰氏于1884年所发明的,初其是用来鉴别肺炎球菌与克雷伯肺炎菌。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色及复染等四个步骤。未经过染色的细菌,由于其周围的环境折光率别较小,故在显微镜下难以进行区分。

革兰染色的原理是什么?

革兰氏染色(GramStaining)是用于辨别病菌的一种方式:这类染色法运用细菌细胞壁上的微生物物理性质不一样,可将病菌分为两大类,即革兰氏阳性(GramPositive)与革兰氏阳性菌呈阴性(GramNegative)。这一上色方式由荷兰医师汉斯·布拉德·革兰于1884年所创造发明,开始是用于辨别肺炎链球菌与克雷白氏肺炎菌中间的关联,后营销推广为辨别细菌种类的关键特点之一,对由病菌感染造成的病症的疾病诊断及医治拥有普遍主要用途。革兰氏染色结果是如何的呢?

一、基本原理

根据结晶紫初染和碘液媒染后,在植物细胞内产生了不溶解水的结晶紫与碘的合酶,革兰氏阳性菌因为其植物细胞偏厚、肽聚糖网层级较多且化学交联高密度,故遇酒精或甲苯褪色解决时,因缺水反倒使网眼变小,再再加它没有脂质,故酒精解决不容易出现间隙,因而可以把结晶紫与碘合酶紧紧留到壁内,使其仍呈蓝紫色;而革兰氏阳性菌阴性菌因其植物细胞薄、外膜层脂质成分高、肽聚糖层薄且化学交联度,在遇脱色剂后,以脂质主导的外膜快速融解,薄而疏松的肽聚糖网不可以阻拦结晶紫与碘合酶的总混,因而根据酒精褪色后仍呈没有颜色,再经过沙黄等鲜红色染剂复染,就使革兰氏阳性菌阴性菌呈鲜红色[1]。

上色的别主要是阴性与阳性细菌细胞壁的别所造成的。

血压革兰氏阳性病菌的植物细胞

G细菌细胞壁具备偏厚(20-80nm)而高密度的肽聚糖层,高达50层,占细胞壁成分的40%~95%,它同细胞质的表层紧密相连(图2-9)。有的G细菌细胞壁中带有磷壁酸(teichoic-acid),也称胞壁质(murein),它是凡士林和核糖醇的高聚物,磷壁酸一般以糖或碳水化合物的酯而存有。因为磷壁酸带负电,它在体细胞表面调整正离子浓度值。磷壁酸与细胞生长相关,细胞生长中有自溶素(autolysins)酶类起功效,磷壁酸对自溶有着调整作用,阻拦胞壁过多溶解和壁溶。

假如植物细胞的肽聚糖层被消溶,G体细胞变成原生质体(protoplasts),植物细胞荡然无存,而只留存细胞质。除链球菌感染外,大部分G细菌细胞壁中含非常少蛋白。

血液革兰氏阳性菌呈阴性病菌的植物细胞G—细菌细胞壁比G细菌细胞壁薄(15~20nm)而构造较繁杂,格外膜(outermembrane)和肽聚糖层(2~3nm)(图2-10)。在植物细胞和细胞质膜中间有一个显著的室内空间,称之为壁膜空隙(periplaicspace)。

外膜G—细菌细胞壁外膜的基本成份是脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),它同细胞质膜相似之处也是两层脂质,但除不饱和脂肪酸外还带有含糖量和蛋白。

LPS的含糖量一部分包含关键含糖量和O-特异含糖量。O-特异含糖量由反复支系的碳水化合物化合物分子结构构成,带有已糖(葡萄糖、半乳糖和鼠李糖)和二脱氨已糖。因为糖的种类不一样,使各种各样G—体细胞具备不一样特点的LPS。关键含糖量(corepolysaccharide)的关键成分是酮脱氨心酸(ketodeoxyoctonate,KDO)。

外膜中还带有几类蛋白质,如蛋白、透亮蛋白质。一些蛋白质具备埋孔功效(porin),管控外部分子结构进到体细胞;有的蛋白质分子结构能够做为噬菌体的蛋白激酶;很多G—病菌对高微生物有高致病是由LPS的成份决策的,它的毒副作用成分常称之为毒素累积(endotoxins)。

革兰氏染色的步骤和原理

革兰氏染色的步骤和原理如下:

步骤:

1、首先在载玻片上滴一小滴蒸馏水,用灼烧过的接种针挑取少量细菌,置载玻片的水滴中与水混合并涂抹开,注意涂抹要均匀平坦,涂抹后直径约为1 cm的薄层。

2、固定。将载玻片在火焰上方固定。

3、染色。加路哥式碘液大概一滴,作用1 min后用水冲洗,注意流水不要直接往薄层上冲,用过滤纸吸干。

4、脱色。用95%乙醇脱色,一般脱色时间大概为30 s。

5、观察。

干燥后,用油镜镜检观察,并做好记录。

原理:染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。

革兰染色在医学上的重要意义:

1、鉴别细菌:用革兰染色法可将所有细菌分成革兰阳性菌及革兰阴性菌两大类,便于初步识别细菌。

2、选择物:临床上可很据病原菌的革兰染色性,选择有效的抗生素用于治疗。

3、与致病性有关:有些革兰阳性菌能产生外毒素,而革兰阴性菌则主要具有内毒素,两者致病作用不同。

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