m1型和m2型巨噬细胞 m1型和m2型巨噬细胞功能

细胞学堂 | THP-1（人单核细胞白血病）如何诱导分化？

THP-1（人单核细胞白血病）来自一位急性单核细胞白血病患者的血液，在实验研究中，常常诱导其分化为巨噬细胞和泡沫细胞。

m1型和m2型巨噬细胞 m1型和m2型巨噬细胞功能

本期普诺赛为大家总结了分化类型及其具体实验操作。

THP-1分化为巨噬细胞

巨噬细胞是重要的免疫效应细胞，在固有免疫和适应性免疫应答中发挥重要作用。同时，它也是高度异质性的细胞，受局部微环境的影响，可活化为不同的类型，展现出不同的表型和功能。由于巨噬细胞在不同的组织环境和生理、病理条件下的异质性， 巨噬细胞被分为两种主要类型：M1型巨噬细胞和M2型巨噬细胞 。

THP-1细胞通常用佛波酯（PMA）诱导分化为巨噬细胞，然后在PMA仍然存在的情况下：

脂多糖(LPS)(100ng/mL)、IFN-γ(20ng/mL)培养48h，诱导其向M1极化；

IL-4(20ng/mL)、IL-13(20ng/mL)培养48h，诱导其向M2极化；

后，在无物和无PMA的情况下，用无血清RPMI-1640培养基重悬细胞，可保持72h。

图1. 巨噬细胞分化为M1和M2

PMA诱导THP-1步骤：

将处于对数生长期的THP-1细胞离心，用RPMI-1640培养基重悬；

加入PMA，显微镜下细胞计数，调整THP-1细胞密度为510^5/mL；

使PMA终浓度为100ng/mL，将细胞种入六孔板，每孔加入细胞2mL；

48h后，显微镜下观察巨噬细胞构建成功。

单核细胞THP-1用PMA诱导后， 由悬浮式生长变成贴壁生长，由圆形变成不规则形态，体积进一步增大，细胞浆疏松，细胞核增大明显，可见大量明显细胞器，胞膜周围可见少量突起 。

图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞

THP-1分化为泡沫细胞

THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后，可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞，这也是动脉粥样硬化产生的原因。

将THP-1细胞经PMA诱导为巨噬细胞后，可用RPMI-1640培养基配制氧化修饰低密度脂蛋白OX-LDL ，使其终浓度为80mg/L，加入六孔板中，每孔量为2mL，干预24h。

油红O染色步骤：

单核细胞源性巨噬细胞用OX-LDL诱导24h后, 倒置显微镜下观察， 巨噬细胞体积进一步增大，细胞膜突触形成明显，胞浆增加，疏松化，可见大量细胞器及吞噬的脂质小滴 。油红O染色后，细胞浆内可见大量红染物质。

图3. 巨噬细胞经OX-LDL诱导后用油红O染色

小鼠腹腔分离的单核巨噬细胞属于哪种类型

巨噬细胞（macrophages，MΦ）是由血液中单核细胞迁入组织后分化形成的成熟类细胞，广泛分布于脾脏、肝脏、腹腔、神经系统以及结缔组织等，具有吞噬杀伤、抗原提呈及免疫调节作用。近年的研究发现巨噬细胞在不同微环境中可以发生不同性质的活化，成为具有不同表面分子和功能特征的亚群。根据其不同的表型特点和功能特点及对 Th1／Th2 应答的诱导，通常将其分为两种类型：经典活化的巨噬细胞（classically activated macrophage，CAM），又称 M1 型巨噬细胞；替代性活化的巨噬细胞（alternatively activated macrophage，AAM），又称 M2 型巨噬细胞。M1 型巨噬细胞具有杀灭微生物、参与炎症及抗肿瘤作用。M2 型巨噬细胞具有很强的免疫调节、组织修复及抗炎能力

巨噬细胞m1和m2的表面标记物是什么，功能区别？

巨噬细胞是在免疫应答和组织修复过程中发挥着关键作用的免疫细胞。根据其功能和表型的不同，巨噬细胞可以分为两种亚型：M1和M2巨噬细胞。这两种亚型具有不同的表面标记物和功能。

M1巨噬细胞是一种充满活力的、具有杀伤力的巨噬细胞亚型。它主要参与细胞介导型免疫反应，对于细菌、等外源性致病微生物清除能力强。 M1巨噬细胞表面标记物包括CD86、CD80、CD40等共分子以及一些分泌型细胞因子如IL-1β、IL-6、IL-12、IL-23和TNF-α等。这些分子的共同作用可促进T细胞的增殖和分化，进而加强细胞介导型免疫反应，并促进趋化因子的生成，吸引其他免疫细胞到达炎症部位。

M2巨噬细胞则是一种具有免疫调节和组织修复功能的亚型。它主要参与体液免疫反应，并能够清除伤口处的残留物，并周围组织的再生和修复。M2巨噬细胞表面标记物包括CD206、CD163、CD209等分子，同时会分泌IL-10和TGF-β等具有抗炎和修复作用的细胞因子。这些分子的共同作用可调节免疫反应，减轻局部组织的炎症反应，促进伤口愈合，并在一定程度上防止疤痕形成。

M1和M2巨噬细胞的表面标记物和功能存在显著的区别。研究巨噬细胞的亚型转换机制，可以为相关疾病预防和治疗提供重要依据。

镜下m1和m2形态

你想问的是镜下m1和m2形态是什么样子吗？这种状态下m1和m2形态如下：

1、M1和M2是活化的巨噬细胞，可保护我们的免疫系统并维持体内平衡，M1巨噬细胞通过分泌促炎细胞因子以其杀菌和杀瘤特性而闻名，M1型巨噬细胞对细菌和肿瘤等入侵者具有侵袭性功能。

2、巨噬细胞是一种特殊的免疫细胞，对外界表现出显著的可塑性。M2巨噬细胞促进免疫抑制反应并帮助癌症进展，M2型巨噬细胞是抗炎细胞，促进肿瘤免疫，肿瘤相关巨噬细胞是形成肿瘤微环境的关键决定因素，即典型的M2细胞。

骨髓巨噬细胞的传代

骨髓巨噬细胞是一类巨型白细胞，是由骨髓中的造血干细胞分化而来。它们主要存在于血液和组织中，可清除异物和病原微生物，吞噬和消化细胞的残骸。巨噬细胞在发育过程中涉及到多种信号通路和因子的调控，如CSF1和M-CSF等因子，促进巨噬细胞增殖和分化，并参与各种生理病理过程。巨噬细胞还可以参与到免疫反应的不同阶段，被分为M1和M2亚型，融入到不同的免疫反应中，从而调节不同的生理病理状态，如炎症反应、感染和组织修复等。