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怎样绘制高效液相色谱的标准曲线?

怎么根据液相峰面积画图

根据液相峰面积画图:当各种色谱条件严格不变的情况下,一定进样范围内色谱峰的半峰宽不变,即可用峰高来代替峰面积来定量。

怎样绘制高效液相色谱的标准曲线?怎样绘制高效液相色谱的标准曲线?


特别对于出峰快的的色谱峰峰形尖锐,半峰宽很小,采用峰高定量比峰面积更方便、快速。高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。

峰高和峰面积的选择

在色谱定量分析中,选用峰高法还是选用峰面积法,主要决定在检测器的线性范围内,峰高和峰面积测量的准确性和重复性。除了归一化法用峰面积法外,其他三种定量方法中峰高和峰面积都可用作的定量方法。

在检测器的线性范围内,峰高和峰面积测量的准确性受色谱分离度的影响,要准确地测量峰高和峰面积,色谱分离应达到一定的分离度才行。

高效液相色谱法的实验但是不知道该用哪个峰面积

应该是第二个峰,图上保留时间是3.095min的那个峰,然后看底下的峰表,峰面积是505.77的那个。

我需要问一句,你是计算含量,还是计算有关物质杂质?

如果是后者,那么每一个峰都应该清清楚楚的。那么个色谱峰,你需要确定是溶剂,还是杂质。

一般进液相也应该打一针空白溶剂,就是你用来溶解样品的溶剂。然后就可以扣除掉你样品中的溶剂峰了。

如果你的溶剂没有在1.116min出现色谱峰,那么个色谱峰就是你的杂质。也就是说你的样品是不纯的,他的纯度只有99.13%(峰面积%)。

如果你是计算含量,就没有必要管什么纯度了。不过,含量一般用外标法,或者是标准曲线法。你看一下对照品的色谱图,图上的色谱峰是什么时间出峰就很清楚自己需要用那个时间的色谱峰了。

怎样绘制高效液相色谱的标准曲线

手工绘制吗?比较难哦:以标准溶液的峰面积为横坐标,浓度为纵坐标,一一对应在图上画点,再用直线穿过,尽量接近所有点,即得一条标准曲线;

用excel画比较简单:输入峰面积和浓度,选择插入图表,选散点图,平滑散点,把面积和浓度连接到图里,再对曲线做一条趋势线,这条趋势线就是标准曲线图。

用工作站绘制,问一下仪器的生产商吧。

高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么呢?谢谢!

峰高指待测组分从柱后洗脱出浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确

峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAUmin, AUmin或mVmin,代表相对含量比较准确

峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%

不知回答得满不满意

如何分析高效液相色谱图

色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。

高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。

和实验相关的参数:

1、保留时间-也就是可以定性的数据参数

如果使用同样的色谱柱,同样的流动相,分析同样的样品,那么这个样品的保留时间,应该是固定的。不同保留时间的色谱峰,应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱,那么色谱峰越靠后,它对应物质的极性也就越小。

2、峰面积-也就是可以定量的数据参数

这是你在色谱图中可以读出来的参数,在同一个色谱条件下,同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说,如果你配制1.0mg/ml的X物质,进样后峰面积是10000,那么,你配制0.5mg/ml的X物质,进样后峰面积不多就是5000

3、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件

同一样品,同一方法,同一色谱柱,在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。

若高效液相色谱标准曲线用各组分的质量浓度对峰高作图,能给出准确结果吗?

是的,可以给出准确结果。高效液相色谱法标准曲线的制作过程就是根据各组分的质量浓度对峰高作图,得到一条曲线,然后通过校正扣除掉离群值和欠峰值,终得到色谱图中各个点的理论板数及相应的峰面积。因此,用各组分的质量浓度对峰高作图能给出准确结果。

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