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高效液相色谱峰图分析 高效液相色谱图峰值

高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么呢?谢谢!

峰高指待测组分从柱后洗脱出浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确

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峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAUmin, AUmin或mVmin,代表相对含量比较准确

峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为%

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高效液相色谱法原理色谱图怎么分析

基本的信息是二维的:不同时间点的响应值。通过对谱图的处理(计算机完成),得到保留时间和峰面积(及峰高),前者用于定性,后者用于定量。普通的UV检测、ELSD检测、RI检测等,要用对照品定位和定标,MS检测可用MS谱图定性,定量仍需对照品。

如何分析高效液相色谱图

色谱图,其实简单地讲,是一个横坐标是时间,纵坐标是电信号的二维图谱。

高效液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。

和实验相关的参数:

1、保留时间-也就是可以定性的数据参数

如果使用同样的色谱柱,同样的流动相,分析同样的样品,那么这个样品的保留时间,应该是固定的。不同保留时间的色谱峰,应该表现出的是不同的物质。如果你跑的是反相色谱,那么色谱峰越靠后,它对应物质的极性也就越小。

2、峰面积-也就是可以定量的数据参数

这是你在色谱图中可以读出来的参数,在同一个色谱条件下,同一个物质的浓度和峰面积是成正比的。也就是说,如果你配制1.0mg/ml的X物质,进样后峰面积是10000,那么,你配制0.5mg/ml的X物质,进样后峰面积不多就是5000

3、波长-这个是可以顺利进行试验的前提条件

同一样品,同一方法,同一色谱柱,在不同波长的峰面积是不同的。一个物质指在某些特殊波长下有吸收。比如一个物质在210nm和254nm处有吸收。那么波长在280nm处可能无法检出该物质。所以一个实验方法开始时要进行波长扫描。

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